可見(jiàn)分光光度法
植物總酚（TP）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 貨號(hào)：YJS2309
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：60%乙醇， 自備。
試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存。1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
產(chǎn)品說(shuō)明：
植物酚類(lèi)物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而 廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
在堿性條件下，酚類(lèi)物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在 760nm 處有特征吸收峰，測(cè) 760nm 處的吸光值，即可得樣品總酚含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。
操作步驟：
一、總酚提取
將樣本烘干至恒重，粉碎，過(guò) 40 目篩之后，稱(chēng)取約 0. 1g ，加入 2.5mL 提取液，用超聲提取法進(jìn) 行提取，超聲功率 300W ，破碎 5s ，間歇 8s ，60℃ , 提取 30min 。12000rpm ，25℃ , 離心 10min ， 取上清，用提取液定容至 2.5mL ，待測(cè)。
二、標(biāo)準(zhǔn)品制備：
將 1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液二倍稀釋至 0.3125、0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049、 0.0024 、0.0012 、0.0006mg/mL ，待測(cè)。
三、測(cè)定操作表
1 、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 760nm ，蒸餾水調(diào)零。
2 、操作表
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
樣本待測(cè)液 ( μL） | 50 | 50 | - | |
標(biāo)準(zhǔn)液 ( μL） | 50 | |||
蒸餾水 ( μL） | 50 | |||
試劑一 ( μL） | - | 250 | 250 | 250 |
混勻，室溫靜置 2min | ||||
試劑二 ( μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
蒸餾水 ( μL） | 700 | 450 | 450 | 450 |
混勻，室溫靜置 10 min， 1mL 比色皿，測(cè)定 760nm 吸光值。 | ||||
空白管只測(cè)一次。
四、總酚含量計(jì)算
1 、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：
以不同濃度的單寧酸為 x 軸，ΔA（A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白）為 y 軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) y= kx+b。
2 、植物總酚含量計(jì)算：
將ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，求 x(mg/mL)。
（1） 按樣本鮮重計(jì)算
總酚含量（mg/g 鮮重）= x×V 提取÷W= 2.5x÷W （2） 按樣本
蛋白濃度計(jì)算
總酚含量（mg/mg prot）= x×V 提取÷（V 提取×Cpr）= x ÷Cpr
V 提取：提取液體積，2.5 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。
注意事項(xiàng)：
（1）OD 值大于 1.0 ，樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定，注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
（2）試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途！
從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù)，協(xié)助客戶(hù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年，是您值得信賴(lài)的科研合作伙伴!
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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)：
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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細(xì)胞熒光染料標(biāo)記檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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